EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。...
使用方法接種細(xì)胞:用膠原酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。轉(zhuǎn)染前18-24小時(shí)進(jìn)行細(xì)胞的鋪板,以便在轉(zhuǎn)染時(shí),貼壁細(xì)胞的密度大約在80%左右。注:培養(yǎng)液中的血清和抗生素不影響轉(zhuǎn)染效率。2.準(zhǔn)備EZTrans-DNA復(fù)合物(1)轉(zhuǎn)染前將所有試劑置于室溫10分鐘。下面,以轉(zhuǎn)染24孔板培養(yǎng)皿為例,說明轉(zhuǎn)染的具體方法(如果在別的培養(yǎng)器皿中進(jìn)行轉(zhuǎn)染,各試劑建議使用量見表1.:(2)將1μg質(zhì)粒DNA稀釋到40μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基,用移液槍吹吸3-4次。(3)將3μLEZTran...
ELISA檢測系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術(shù)手段。自己也為此苦惱過很長一段時(shí)間,跟著自己技術(shù)水平得進(jìn)步,或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣,也是熟能生巧吧,現(xiàn)在做方陣,做ELISA已是輕車熟路了,以前檢測一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的,現(xiàn)在給我十個(gè)八個(gè)的從包被到顯色,一個(gè)工作日基本搞定。ELISA試劑盒可是在新老手操縱過程中老是會泛起或大或小的題目,本人在剛開始做ELISA時(shí)就面對良多災(zāi)題,固然有師兄師姐鋪路,但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣,好比說花板...
產(chǎn)品描述李記胎牛血清每一批原材料都經(jīng)嚴(yán)格篩選,經(jīng)過3次100nm(0.1μm)過濾,過濾材料符合美國FDA文件要求(21CFR211.72),整個(gè)生產(chǎn)過程符合胎牛血清生產(chǎn)、檢測標(biāo)準(zhǔn)(EuropeanUnion(EU)Approved)。內(nèi)毒素含量≤5EU/ml,100%不含病原性病毒(BVDV,IBRV,BPIV3),血紅蛋白含量≤0.02%(w/v),批次間質(zhì)量穩(wěn)定,適合于多種細(xì)胞培養(yǎng),也可用于原代細(xì)胞、部分干細(xì)胞的培養(yǎng)。血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)...
吲哚花菁綠(ICG,indocyaninegreen)是經(jīng)過FDA認(rèn)證的菁染料,出于安全考慮,后期應(yīng)用于活體(人、動物、細(xì)胞)的染料在結(jié)構(gòu)上都和ICG有相似或相近之處。cy系列染料是Amersham公司(目前為GE公司)zui初開發(fā)的染料體系,它的橋環(huán)由苯并吲哚變?yōu)檫胚岘h(huán),并在吲哚的苯環(huán)上對稱地引入硫酸根基團(tuán),水溶性得到很大改善,分子量降低后對大分子的親和力有所增加。cy系列菁染料多帶有羥基琥珀酰亞胺活性酯(NHSester)、異硫氰酸酯(NCS)等活性基團(tuán),可與蛋白質(zhì)、多肽...
問:您是否為EB有毒,安全染料貴的問題而煩惱?答:試試?yán)钣浬锏腄NA電泳套裝吧!圖1:I、Hela細(xì)胞與EB,李記套裝的上樣buffer及李記GelRed在室溫下孵育一小時(shí),用Olympus熒光顯微鏡觀察并拍照,與EB孵育的細(xì)胞顯示出綠色熒光,表明染料已透過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞并與核酸結(jié)合。李記套裝的上樣buffer及李記GelRed未顯示熒光,說明李記染料未能透過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞。II、EB,李記套裝的上樣buffer及李記GelRed染料相同DNA濃度下染色效果。李記生物的DN...
細(xì)胞凍存過程對保持細(xì)胞狀態(tài)影響巨大,李記生物結(jié)合多年實(shí)踐,總結(jié)出如下實(shí)用的細(xì)胞凍存流程。“慢凍快融”是細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則,這對zui大限度的保存細(xì)胞活力至關(guān)重要。目前細(xì)胞凍存多用甘油或二甲基亞砜(DMSO)作為保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性;細(xì)胞凍存和復(fù)蘇時(shí),減少細(xì)胞內(nèi)冰晶產(chǎn)生是關(guān)鍵。緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少冰晶對細(xì)胞的物理損傷。復(fù)蘇細(xì)胞采用快速融化的方法可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)融化,避免由于緩慢融化使水分滲...
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